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分析現有轉運鼻咽拭子病-毒標本的液體培養基可以看出,目前液體培養基主要關注兩類問題,一方面是液體培養基配方本身的性能問題,需解決非滅活型保存液如何更完整地保存病-毒的原始性狀及活性,滅活型保存液如何滅活病-毒的同時有效保護核酸不被核酸酶降解,各種保存液如何保證樣本保存液采集標本后的存儲條件溫和且保存時間盡量延長等問題;另一方面關注的問題主要是保存液如何提高產品穩定性及滅活型。在這兩方面,德晟公司針對病-毒保存液做出了相應的處理。
非滅活型保存液——提高產品穩定性
因市面上很多現有的非滅活型樣本保存液成分富含氨基酸、蛋白質等營養物質容易滋生微生物,且抗生素類物質無法耐受高溫、輻照等滅菌方式。為了保持產品的穩定性,德晟研發生產的非滅活病-毒保存液是不含裂解鹽,但是保存的病-毒完整性更好,檢出率更高,除了核酸檢測外還可以用于其他研究。它具有抗細菌和抗真菌的作用;牛血清白蛋白(BSA)作為蛋白質穩定劑,可在病-毒的蛋白質外殼形成一種保護膜,使其不易分解,保證病-毒的完整性;Hanks緩沖液構建的中性環境,有助于增加病-毒的生存時間和感染穩定性。再就是對菌落的控制我們是非常嚴格的,以免產品出現長菌現象。
滅活型保存液——提高產品滅活性
關于滅活型樣本保存液的相關研究表明,常用的病-毒裂解劑 AVL 和 RLT 緩沖液處理后的病-毒仍然存活,這提示我們對滅活型樣本保存液針對特定病-毒的滅活能力應當進行相應的臨床評估。還有研究表明,一旦加入乙醇,AVL 就可以完全滅活 EBOV 病-毒,但這與下游自動核酸提取系統不兼容。這提示我們改進滅活型樣本保存液的同時還應驗證對下游核酸提取及檢測的影響。
德晟和高校專家獨家研制的滅活型病-毒保存液,含有特殊的蛋白變性劑和核酸穩定劑,蛋白變性劑可以迅速破壞病-毒外殼蛋白質的二級結構,將病-毒滅活。當帶有新冠病-毒的臨床樣本與保存液混合,樣本中的病-毒受裂解液作用,蛋白質外殼被迅速破壞,并且這種破壞是不可復原的。核酸穩定劑可以常溫穩定保存病-毒核酸不降解,可以在37℃條件下穩定保存7天,非常利于核酸檢測的樣本保存。