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核酸檢測(實時熒光RT-PCR方法)是確診新冠肺炎的金標(biāo)準(zhǔn),在核酸檢測的具體流程中,核酸提取是十分關(guān)鍵的環(huán)節(jié)。根據(jù)已公開報道,TRIS、***胍、EDTA等試劑在核酸提取中發(fā)揮著重要的作用。
核酸是由許多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,包括脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)兩類,是生命的最基本物質(zhì)之一。核酸提取是指利用物理、化學(xué)等方法將核酸從樣品中分離出來的過程,是核酸擴(kuò)增、DNA片段連接、載體構(gòu)建、高通量測序等一系列分子生物學(xué)分析的前提技術(shù),是生命科學(xué)研究、生物及時應(yīng)用及基因診斷中非常重要的一項技術(shù),因此,核酸的提取具有十分重要的意義。
一般來說,核酸提取是需要多步驟的工作,首先需要對細(xì)胞、組織材料等生物樣本材料進(jìn)行破碎處理,失活核酸酶,釋放核酸,而TRIS、***胍、EDTA等試劑的作用主要體現(xiàn)在釋放核酸環(huán)節(jié)。
核酸(DNA、RNA)在酸性溶液中易水解,在中性或弱堿性溶液中較穩(wěn)定。而TRIS即三羥甲基氨基甲烷,PH緩沖范圍:7.0-9.0,能夠維持待提取樣品裂解后釋放的核酸的穩(wěn)定性,以避免核酸的降解,提高核酸的濃度和純度。
***胍是核酸酶的強(qiáng)抑制劑,利于從富含RNASE的組織提取完整的RNA。***胍不僅能夠快速的破壞細(xì)胞膜,還能夠變性蛋白質(zhì),使得蛋白質(zhì)變性沉淀,從而讓核酸能夠擺脫蛋白質(zhì)的纏繞。
EDTA即乙二胺四乙酸,其能夠與Mg2+、Ca2+、Mn2+、Fe2+等金屬離子結(jié)合,可防止金屬離子激活蛋白酶,從而減少金屬離子對核酸質(zhì)量的影響。
綜上,TRIS、***胍、EDTA等試劑在核酸提取過程中,能夠充分有效地裂解細(xì)胞,使細(xì)胞中的核酸能夠充分釋放,得到濃度更高的核酸,有利于提高核酸的質(zhì)量,保證后續(xù)操作的準(zhǔn)確性。近期核酸檢測需求加大,TRIS需求也進(jìn)一步增加,德晟作為專業(yè)的緩沖劑生產(chǎn)廠家,可大量提供可供核酸檢測的TRIS產(chǎn)品,能滿足各大廠商的技術(shù)要求,有需求的可聯(lián)系訂購,量大價格又優(yōu)惠!