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PIPES,中文名為1-4-哌嗪二乙磺酸,是一種兩性緩沖液pH緩沖范圍是6.1-75,不溶于水,溶于NaOH水溶液。其在pH7.2-74范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力。當往某些溶液中加入一定量的酸和堿時,有阻礙溶液pH變化的作用,稱為緩沖作用生物緩沖這樣的溶液叫做緩沖溶液。
PIPES緩沖劑的應用:
PIPES緩沖劑廣泛用于細胞培養(yǎng),色譜,化妝品,診斷測試,蛋白質(zhì)純化和電子顯微鏡研究。PIPES緩沖劑類似于MES緩沖劑和MOPS緩沖劑,不過該生物緩沖劑缺乏與大多數(shù)金屬離子形成螯合物的能力,所以在金屬離子溶液中推薦用作非配位緩沖劑。
PIPES緩沖劑的優(yōu)勢:
近段時間從專業(yè)文獻上得知,在人體皮膚,人體肥厚疤以及軟體動物神經(jīng)組織等各種組織的超微結(jié)構(gòu)觀測實驗所使用的戊二醛溶液中,相比較添加NaOH-PIPES緩沖劑與PIPES緩沖劑的差異。結(jié)果表明,添加了NaOH-PIPES緩沖劑后可以幫助研究人員觀察到細胞器和組織之間的更多細節(jié),并且細胞質(zhì)的一致性更均勻。如果添加NaOH-PIPES緩沖劑則能更普遍的觀測到微絲和微管。此外,證明了PIPESBuffer與培養(yǎng)物中的活細胞具有可比性。
PIPES不同于含二(2-羥乙基)氨基基團的緩沖劑(如Bis-tris,Bicine),與多數(shù)金屬離子不能形成穩(wěn)定配合物,適用于含有金屬離子的溶液體系中的緩沖劑。根據(jù)已有的研究結(jié)果PIPES可被應用于使用磷酸纖維素色譜純化微管蛋白,用于凝膠過濾法純化重組GTP結(jié)合蛋白ARF1和ARF2,作為緩沖液從大腸桿菌中結(jié)晶轉(zhuǎn)酮酶。另外,由于PIPES能形成自由基,因此不適合應用于氧化還原體系。在陽離子交換色譜法,應當使用低濃度的PIPES緩沖液,這是因為PIPES具有相對較大的離子強度,而且其pKa值具有濃度依賴性。