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當(dāng)疫情再一次伺機而動時,要想快速的控制病毒的傳播,做核酸檢測就成了必經(jīng)之路,同時也備受各界關(guān)注。但影響核酸檢測結(jié)果的因素是多種多樣的,包括樣本采集部位、采集方式、儲運過程、核酸提取操作等等。其中,樣本的穩(wěn)定性是一個關(guān)鍵環(huán)節(jié)。如何能使病毒快速失活,又能保護病毒核酸不被降解,維持檢測穩(wěn)定性的病毒樣本保存液就成了重中之重。
第一步:打破外殼,消滅“戰(zhàn)斗力”
和其他RNA病毒一樣,新冠病毒的結(jié)果簡單來說,是由蛋白質(zhì)外殼包裹著單鏈核酸——RNA構(gòu)成的。我們可以簡單地將病毒的RNA視為發(fā)號施令的“大腦”,蛋白質(zhì)則是執(zhí)行命令的“四肢”。新冠病毒感染人體并發(fā)生繁殖活動,引發(fā)病癥,這個過程都主要由病毒外部具有生物活性的蛋白結(jié)構(gòu)完成。
滅活型病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒;它是一種強有力的蛋白質(zhì)變性劑,能迅速溶解蛋白質(zhì),導(dǎo)致病毒結(jié)構(gòu)破碎。當(dāng)帶有新冠病毒的臨床樣本與保存液混合,樣本中的病毒受裂解液作用,蛋白質(zhì)外殼被迅速破壞,并且這種破壞是不可復(fù)原的。這時候,病毒就失去了作惡的“爪牙”,不再擁有對人的感染能力,從而保障了樣本運輸、處理過程中接觸者的安全。
第二步:抑制酶活,押送“身份證”
外殼裂解后,新冠病毒的RNA游離在保存液當(dāng)中。作為單鏈大分子,RNA的穩(wěn)定性不像雙鏈的DNA那樣巋然不動,在自然環(huán)境中隨處存在的RNA酶便是使RNA水解斷裂的罪魁禍?zhǔn)住R虼耍ǔUJ為失去外殼保護的病毒RNA是脆弱、不穩(wěn)定的,需要低溫儲存才能保證它的完整性。
第三步:配合提取,確認“真兇”
病毒RNA妥善地儲存在病毒樣本保存液中,在進行檢測前,還需要最后一個步驟:將保存液中的RNA捕捉、濃縮,作為最終樣本加入實時熒光PCR體系中,上機進行檢測。
德晟生產(chǎn)的病毒保存液除了滅活型病毒保存液外,還有非滅活型病毒保存液。它是同時保留病毒的蛋白質(zhì)外殼和病毒核酸DNA或者是RNA,這樣病毒在體外具有蛋白抗原表位和核酸的完整性,當(dāng)然操作失誤時也有一定的感染性風(fēng)險。采樣后長時間保存需要保持嚴(yán)格低溫。不管是哪種病毒保存液,我們在使用時都需要按照要求嚴(yán)格操作、存放或運輸。