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化學發光試劑已經由最初的魯米諾、異魯米諾試劑,發展到光澤精、吖啶酯、AMPPD以及三聯吡啶釕電化學發光試劑,技術上已經有了重大飛躍,在體外診斷技術中的占比已達到50%。化學發光免疫分析技術發展迅速,其基本的原理都是類似的。
化學發光免疫分析定義
反應體系中的某種物質的分子(如魯米諾、吖啶酯),包括反應物、產物、中間體或熒光物質,吸收了反應所釋放的能量而有基態躍遷至激發態,然后再次回到基態時,會將能量以熱或者光的形式輻射出來,如輻射的是可見光則就是化學發光。將化學發光反應用于分析化學,根據某一時刻的發光強度或反應的發光總量來確定體系相應組分含量的分析方法,即為化學發光分析,與免疫反應結合則為化學發光免疫分析。
化學發光必要條件
一是反應能釋放一定的能量,且能量可以被某種產物或中間體吸收,使之處于激發態;二是這種激發態物質具有一定的化學發光量子產率,或者可以將其能量有效地轉移給某種熒光物質,產生光輻射。
化學發光現象的發現
1. 螢火蟲體內的生物發光即是一種化學發光反應產生的。
2. 洛酚堿(三苯基咪唑)在堿性介質中被過氧化氫等試劑氧化時發出綠色的光。
3. 魯米諾(3-氨基鄰苯二甲酰肼)在堿性介質中氧化發光,氧化的條件可以是血跡(血紅蛋白)、漂白劑等氧化劑,或者是過氧化物酶存在下的過氧化氫。
4. 光澤精(N,N-二甲基二吖啶硝酸鹽)與過氧化氫反應產生化學發光
5. 吖啶酯堿性條件下唄過氧化氫氧化直接產生化學發光,此外還有三聯吡啶釕的電化學發光等等。
多種類型的吖啶酯及其它試劑的發光標記物應用技術也日趨先進,化學發光分析不適用任何光源,避免了背景光雜散光干擾,靈敏度達到納克級、皮克級或更高。德晟是化學發光試劑研發企業,可提供多種魯米諾、吖啶酯等化學發光試劑。