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化學發光免疫分析CLIA是繼酶免分析技術(EIA)、放射免疫分析技術(RIA)、熒光免疫分析技術(FIA)、時間分辨熒光免疫分析技術(TRFIA)之后新興的免疫分析技術,檢測速度快、靈敏度高、特異性高且自動化程度高。
不同化學發光試劑區別:
吖啶酯并不是CLIA中唯一的化學發光試劑,還有魯米諾、異魯米諾、金剛烷二氧環乙烷、三聯吡啶釕等。
魯米諾,需要過氧化物酶如POD或HRP的催化,對反應環境的pH要求以及溫度要求較高;異魯米諾較魯米諾發光體系發光效率低,但其苯環上的氨基可以進行官能團取代,提高發光效率并且方便標記。
金剛烷二氧環乙烷,金剛烷體系需要堿性磷酸酶參與,同樣易受環境pH值、溫度等因素影響。
三聯吡啶釕是電化學發光體系,儀器設備的性能要求較高,清洗條件要求苛刻。
而吖啶酯屬于直接化學發光,不需要酶的催化,且可以直接標記蛋白、抗體、核酸等。具有背景低、標記工藝簡單、標記后光量子產率不減少、發光時間短、穩定性好等優點,目前綜合優勢較大。
光澤精,同樣含有吖啶結構,與吖啶酯較類似,早期使用較多;還有過氧草酸酯等,使用較少。
吖啶酯化學發光特點:
吖啶酯化學發光為閃光型,在化學發光免疫分析領域與其它技術相比具有優勢,吖啶酯化學發光在加入啟動劑0.4s后發射光強度達到最大,半衰期為0.9s,2s內發光基本結束,可以實現快速檢測。吖啶酯標記工藝簡單,標記反應一步完成,發光過程只需要在堿性條件下,經過氧化氫氧化就可以直接發光,不需要其它發光催化劑。
為了使吖啶酯適應不同的蛋白質、抗體、核酸的研究實驗,可進行官能團的取代使其性能更好,比如吖啶磺酰胺、便于標記的NHS酯等。根據不同的官能團取代,德晟研發生產的吖啶酯目前已有6種。