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[標本的采集與保存]
1、 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4oC過夜,然后1000×g離心20分鐘,取上清即可,或將上清置于-20oC或-80oC保存,但應避免反復凍融。
2、 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8oC 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20oC或-80oC保存,但應避免反復凍融。
3、 組織勻漿:
1) 取適量組織塊,于預冷PBS(0.02mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,稱重后備用(組織塊較大需先剪碎后再勻漿);
2) 可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果:首先將組織塊移入玻璃勻漿器,加入5-10mL預冷PBS進行充分研磨,該過程需在冰上進行(有條件實驗室可選用機器勻漿);得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復凍融進一步處理(超聲破碎過程中注意冰浴降溫;反復凍融法可重復2次)。
3) 將制備好的勻漿液于5000×g離心5分鐘,留取上清即可檢測。
4、 細胞培養上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20oC或-80oC保存,但應避免反復凍融。
注意:
1、 以上標本均需密封保存,4oC保存應小于1周,-20oC不應超過1個月,-80oC不應超過2個月。
2、 標本溶血會影響最后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
3、 標本使用前應緩慢均衡至室溫,不應加熱使之融解。