[標(biāo)本的采集與保存]

1、 血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4^oC過(guò)夜，然后1000×g離心20分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20^oC或-80^oC保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2、 血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8^oC 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?20^oC或-80^oC保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3、 組織勻漿：

1） 取適量組織塊，于預(yù)冷PBS（0.02mol/L, pH 7.0-7.2）中清洗去除血液，稱(chēng)重后備用（組織塊較大需先剪碎后再勻漿）；

2） 可同時(shí)選用多種勻漿方法達(dá)到較好的破碎效果：首先將組織塊移入玻璃勻漿器，加入5-10mL預(yù)冷PBS進(jìn)行充分研磨，該過(guò)程需在冰上進(jìn)行（有條件實(shí)驗(yàn)室可選用機(jī)器勻漿）；得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復(fù)凍融進(jìn)一步處理（超聲破碎過(guò)程中注意冰浴降溫；反復(fù)凍融法可重復(fù)2次）。

3） 將制備好的勻漿液于5000×g離心5分鐘，留取上清即可檢測(cè)。

4、 細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它生物標(biāo)本：請(qǐng)1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?20^oC或-80^oC保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注意：

1、 以上標(biāo)本均需密封保存，4^oC保存應(yīng)小于1周，-20^oC不應(yīng)超過(guò)1個(gè)月，-80^oC不應(yīng)超過(guò)2個(gè)月。

2、 標(biāo)本溶血會(huì)影響最后檢測(cè)結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。

3、 標(biāo)本使用前應(yīng)緩慢均衡至室溫，不應(yīng)加熱使之融解。

     [標(biāo)本處理]

1、 Uscn,Inc.只對(duì)試劑盒本身負(fù)責(zé)，不對(duì)因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé)，請(qǐng)使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預(yù)留充足的樣本。

2、 實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)標(biāo)本含量，如果標(biāo)本濃度過(guò)高，應(yīng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行稀釋?zhuān)瓜♂尯蟮臉?biāo)本符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

3、 若所檢樣本不包含在說(shuō)明書(shū)所列樣本之中，建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其有效性，并注意留存樣本。

4、 使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會(huì)由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致  ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。

5、 若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清，因該類(lèi)樣本干擾因素 較多，如：細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時(shí)間等，所以可能存在檢測(cè)不出的情況。

6、 某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白，可能因?yàn)榕c本產(chǎn)品所使用的檢測(cè)抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測(cè)出。

7、 建議使用新鮮樣本，保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏 差。