蛋白印跡實驗通常會在實驗室中給人帶來挫敗感,想要獲得完美的結(jié)果是一項艱苦的工作。而在嘗試可視化大分子量蛋白質(zhì)時,難度會更大。在下文中,將給大家?guī)韼追N用于蛋白印跡實驗中可使用的生物緩沖液。
蛋白印跡實驗中對生物緩沖液的選擇是至關(guān)重要的,在下文將給大家?guī)砣N常見的生物緩沖液各自對蛋白印跡的作用,從而選擇出更適合的一款。
Tri's-甘氨酸具有堿性pH(8.6)和較短的保存期限,電泳時其pH值也會跟著增加(頂峰為9.5),從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)降解和低分辨率印跡。
Bis-Tris的酸性更高(6.4),增加了穩(wěn)定性和保質(zhì)期。其在緩沖液中需要額外的抗氧化劑來維持蛋白質(zhì)的還原,因為常見的還原劑在該系統(tǒng)中不會與蛋白質(zhì)一起移動。
Tris-醋酸鹽的pH值保存在7左右,并且比Bis-Tri's或Tris-甘氨酸分離出具有更高分離度的大分子蛋白質(zhì)。因此,在蛋白的印跡實驗時,建議使用Tris-醋酸鹽。切記在其使用Tris-醋酸鹽緩沖液后,Mops或Mes緩沖液將不起作用。
在這些實驗中,Tris緩沖液的需求量是非常大的,畢竟這些溶液都需要使用Tris緩沖液制備而成。而Tris緩沖液在其他領(lǐng)域方面的應(yīng)用也十分豐富,如有對Tris緩沖液的專業(yè)知識感興趣可進(jìn)入我司官網(wǎng)查看更多信息。當(dāng)然,如有想購買Tris緩沖液或其他的生物緩沖液也可聯(lián)系我司。
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